Riassunto
I
metodi ufficiali previsti dal Piano nazionale di eradicazione della
brucellosi bovina ed ovi-caprina sono la sieroagglutinazione rapida
(SAR) con lantigene
acidificato al Rosa Bengala e la fissazione del complemento (FDC).
Nella attuale fase del piano di eradicazione non è infrequente
imbattersi in risultati di difficile interpretazione ottenuti con
i test ufficiali, pertanto è necessario poter disporre di
test aggiuntivi che presentino livelli di specificità e di
sensibilità più elevati. A questo scopo sono stati
validati due metodi ELISA, indiretto (i-ELISA CL) e competitivo
(c-ELISA CL), mediante lutilizzo
di un substrato chemiluminescente per la determinazione di anticorpi
anti-Brucella in siero bovino ed ovino. I metodi si basano
sulla rivelazione degli anticorpi anti-Brucella, contenuti
nel siero, mediante la catalisi di un substrato enzimatico chemiluminescente
(sistema luminolo/H2O2/ enhancer), da parte della perossidasi coniugata
ad anticorpi secondari anti-IgG, nella i-ELISA CL, o al monoclonale
anti-LPS, nella c-ELISA CL. Sulla base dei risultati ottenuti, per
l'i-ELISA CL è stato stabilito un valore di cut-off,
espresso come percentuale di positività (PP), del 60% per
i sieri bovini e del 37,5% per quelli ovini; con questo valore di
cut-off si ottiene una sensibilità ed una specificità
del test del 100% per i sieri bovini, e una sensibilità del
100% e una specificità del 99,8% per quelli ovini. Per la
c-ELISA CL è stato scelto un cut-off, espresso come
percentuale di inibizione (PI), del 30% per i sieri bovini e del
40% per quelli ovini, che assicura valori di sensibilità
e specificità del 100% in entrambi i casi.
Parole
chiave
Animali,
Bovini, Brucellosi, Chemiluminescenza, ELISA, Ovini, Sierologia.
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