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e-ISSN 1828-1427

 

Rivista trimestrale di Sanità Pubblica Veterinaria edita dall'Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell'Abruzzo e del Molise ‘G. Caporale’

A quarterly journal devoted to veterinary public health, veterinary science and medicine published by the Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Abruzzo e del Molise ‘G. Caporale’ in Teramo, Italy


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2016 - Volume 52 (1), January-March
   
 
Short communication
Daniela Salvatore, Antonietta Di Francesco, Giovanni Poglayen, Gianluca Rugna, Annalisa Santi, Benedetto Morandi & Raffaella Baldelli
 
Molecular characterization of Leishmania infantum strains by kinetoplast DNA RFLP-PCR 71-75
doi: 10.12834/VetIt.554.2623.3
First published on line: 26.02.2016

 
Summary
Multilocus enzyme electrophoresis is the tool most frequently used to classify Leishmania spp., although it is time consuming and, sometimes, a not enough discriminative method. In the present study a kinetoplast DNA polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) was used to characterize 16 zymodeme MON-1 Leishmania infantum strains: 15 were from dogs housed in public kennels of 7 geographical areas in the Emilia-Romagna region, Northern Italy, 1 was the L. infantum reference strain MHOM/TN/1980/IPT1. Six enzymatic patterns were observed. Kinetoplast DNA RFLP-PCR confirmed to have a good discriminatory power within the same zymodeme and proved to be useful for comparing few strains or discriminating between relapse and reinfection in the same host. We therefore recommend it use for discriminating between relapse and reinfection in the same host rather than supporting large-scale epidemiological studies.

Keywords
Dog, Epidemiology, kDNA RFLP-PCR, Leishmania infantum, Molecular typing.


Full text

     

 
Caratterizzazione molecolare di ceppi di Leishmania infantum mediante kDNA RFLP-PCR
 
Riassunto
Il metodo più frequentemente utilizzato per la classificazione di Leishmania spp. è ancora rappresentato dalla caratterizzazione isoenzimatica sebbene sia un metodo laborioso e in alcuni casi non sufficientemente discriminante. Nel presente studio abbiamo utilizzato una reazione di amplificazione del DNA kinetoplastico seguita da digestione enzimatica, al fine di caratterizzare 15 ceppi di Leishmania infantum MON-1, isolati da altrettanti cani ospitati in canili pubblici di 7 differenti aree geografiche del nord Italia. Il ceppo di referenza MHOM/TN/1980/IPT1 di L. infantum è stato incluso nello studio. A conferma del potere discriminante di questa metodica, sono stati osservati 6 differenti profili enzimatici, anche all'interno di uno stesso zimodema. A nostro avviso, kDNA RFLP-PCR può pertanto trovare un'applicazione utile per discriminare i casi di reinfezioni da quelli dovuti a ricadute, piuttosto che in studi epidemiologici su larga scala.

Parole chiave
Cane, Epidemiologia, kDNA RFLP-PCR, Leishmania infantum, Tipizzazione molecolare.


 
 
    © Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell'Abruzzo e del Molise 2016